Etykieta fluorescencyjna
Barwniki fluorescencyjne są ważnymi narzędziami do znakowania biomolekuł. Pochodne fluoresceiny można powszechnie znakować na odczynnikach stosowanych w mikroskopii fluorescencyjnej, cytometrii przepływowej i detekcji immunofluorescencyjnej. Zazwyczaj biotyna, FITC Takie barwniki można dowolnie znakować na końcu N lub C peptydu. Zalecamy jednak, aby znakowanie N End zapewniało wyższy wskaźnik powodzenia, krótszy czas i łatwiejszą obsługę. Ponieważ peptydy pochodzą z syntezy końca C do końca N, zatem modyfikacja końca N będzie ostatnim etapem syntezy w fazie stałej, eliminując potrzebę dodatkowych etapów sprzęgania. I odwrotnie, jeśli jest to znakowanie C End, wymaga to dodatkowych kroków i proces jest bardziej złożony.
Zwykła modyfikacja fluorescencji
| Modyfikacja fluorescencji Chińska nazwa | Koniec N | N Zakończ linkerem |
| Peptydy-znakowane biotyną | Biotyna- | Biotyna-Ahx- |
| izotiocyjanian fluoresceiny | FITC- | FITC-Aha- |
| 5-karboksyfluoresceina | 5-FAM- | 5-FAM-Ach- |
| dansylofluoresceina | Dansyl- | Dansyl-Aha- |
| 5-karboksytetrametylorodamina | TMR- (TAMRA-) | TMR-Ahx- (TAMRA-Ahx-) |
Pass Lys Fluorescencyjna modyfikacja wiązań aminowych w łańcuchu bocznym
| koniec N polipeptydu | środkowa sekwencja polipeptydowa | koniec polipeptydu C |
| Lys(biotyna)- | -Lys(biotyna)- | -Lys (biotyna) |
| Lys(FITC)- | -Lys(FITC)- | -Lys(FITC) |
| Lys(5-FAM)- | -Lys(5-FAM)- | -Lys(5-FAM) |
| Lys(Dansyl)- | -Liz(Dansyl)- | -Lys(Dansyl) |
| Lys(TMR)- | -Lys(TMR)- | -Lys(TMR) |
| Lys(Dnp)- | -Lys(Dnp)- | -Lys(Dnp) |
Długość fali światła wzbudzenia i długość fali światła emisji materiałów fluorescencyjnych, które często produkuje nasza firma
| Fluorofor | Ex(nm) | Em(nm) | Fluorofor | Ex(nm) | Em(nm) |
| Hydroksykumaryna | 325 | 386 | R-fikoerytryna (PE) (489) | 565 | 578 |
| Chlorek dansylu | 340 | 578 | Czerwień Rodamina-X | 560 | 580 |
| AMC | 345 | 445 | Tamary | 565 | 580 |
| Metoksykumaryna | 360 | 410 | Alexa fluor 555 | 556 | 573 |
| Seria Alexa Flu | 345 | 442 | Alexa fluor 546 | 556 | 573 |
| Aminokumaryna | 350 | 445 | Rox | 575 | 602 |
| Dabcyl | 453 | - | Alexa fluor 568 | 578 | 603 |
| Cy2 | 490 | 510 | Teksas czerwony | 589 | 615 |
| FAM | 495 | 517 | Alexa fluor 594 | 590 | 617 |
| Alexa fluor 488 | 494 | 517 | Alexa fluor | 621 | 639 |
| FITC | 495 | 519 | Alexa fluor 633 | 650 | 668 |
| Alexa fluor 430 | 430 | 545 | Cy5 (625) | 650 | 670 |
| 5-FAM | 492 | 518 | Alexa fluor 660 | 663 | 690 |
| Alexa fluor 532 | 530 | 555 | Cy5.5 | 675 | 694 |
| KLĄTWA | 535 | 556 | TruRed | 490; 675 | 695 |
| 5-TAMRA | 542 | 568 | Alexa fluor 680 | 679 | 702 |
| Cy3 | 550 | 570 | Cy7 | 743 | 767 |
| TRITC | 547 | 572 | Cy3.5 | 581 | 596 |